维生素C检测试剂盒(微孔板酶标仪)
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维生素C检测试剂盒
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维生素C检测试剂盒产品简介:
维生素 C又称L-抗坏血酸,是高等灵长类动物与其他少数生物的必需营养素,在生物体内维生素C是一种抗氧化剂,为酸性己糖衍生物,是烯醇式己糖酸内酯,保护身体免于自由基的威胁,同时也是一种辅酶,其广泛的食物来源为各类新鲜蔬果。维生素 C有L-型和 D-型两种异构体,只有L-型才具有生理功能,还原型和氧化型都有生理活性。
华越洋维生素C检测试剂盒(磷钼酸微孔板法)检测原理是在强酸和偏磷酸的根离子存在条件下,钼酸铵能与维生素C反应生成蓝色化合物,在一定浓度范围(样品浓度控制在 25~250ug/ml),吸光度值与浓度呈线性关系,以分光光度计 760nm 处检测吸光度,获得维生素C含量。
本试剂盒检测时反应迅速、操作简便、还原糖及其他常见的还原物质对实验没有干扰。因此专一性好。
本试剂盒测仅用于科研领域,不可用于临床诊断或其他用途。
维生素C检测试剂盒
试剂盒以外自备仪器和试剂耗材
仪器准备:
1.酶标仪
2.恒温水浴锅
3.离心机
4.移液器
维生素C检测试剂盒试剂准备:
1.纯水
2.蛋白定量试剂盒
耗材准备:
1.96 孔板
2.吸头
3.一次性手套
产品应用:
微孔板,酶标仪
维生素C检测试剂盒使用方法:
1.试剂盒中的低温试剂应避免反复冻融,以免失效或效率下降;
2.组织匀浆液(5X)久置或低温保存,容易产生乳白色浑浊;如果白色浑浊不明显,可以直接使用,不影响效果;如果白色浑浊较多,应弃用;
3.待测样品如不能及时检测,应置于 2-8℃保存,3天内稳定;
4.如果样品浓度过高,应用纯水稀释后重新检测,结果乘以稀释倍数;
5.维生素C检测缓冲液现配现用:配好后用不完可 4℃避光保存。如果出现出现白色粘稠物,不可使用,需重新配置;
试剂配制
1.组织匀浆液的稀释:
按组分 B:纯水=1:4的比例稀释,获得1X的组织浆液;
2.MPA 工作液配制:
取一支 1.5gMPA 粉末,充分溶解于 50ml 的组分 D 中:4℃保存 3~4 天有效。
【注】:
- 维生素C检测缓冲液的配制:
取一瓶 2.5g试剂E钼酸铵粉末,充分溶解于50m 纯水中,也可根据使用情况称取一定量的钼酸铵加水按比例溶解即可,4C避光保存。(最好现配现用)
注意:钼酸铵溶于水会逐渐变化成乳白色浊液,则不能使用。
4.维生素C 标准的配制:
取干净离心管或试管,按下表进行操作,依次稀释:
样本处理
1.液体样本:直接加样检测
2.组织/细胞样本
取待测材料,清洗擦干,准确称量5g,加入研磨器内,再加入少量的1x组织匀浆液,研磨碎,留取上清,再次用 1x组织匀浆液研磨,最后一并倒入50ml离心管,补充 1x组织匀浆液至 45ml,充分混匀,4000g离心5min,取0.5ml上清液,加入等量纯水,即为待测样品:
维生素C检测试剂盒操作步骤:
维生素C的加样:
按照下表设置空白管、标准管、样品管,溶液应按顺序依次加入,并注意避免产生气泡。如果样品中的维生素℃的含量过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。
【注】:
0样品的检测最好能设置2平行管,求平均值。
操作表:
立即混匀,30℃水浴15min 室,以空白调零,760nm,测各管吸光度值。
计算:
以系列标准维生素C(25、50、75、100、125、150、200、250ug/ml)为横坐标,以对应的吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。
以样品管的吸光度代入标准曲线方程求得维生素C含量。
100g样品中维生素C含量(mg)=(C0xV1)X100/(m1x1000)=(C0xV1)/(m1x10)
【注】
1.C0为根据待测样品的吸光度值在标准曲线上査出的维生素C的浓度(ug/ml);
2.V1为待测样品的总体积(ml):
3.m1 为样品的质量(g);
4.1000:ug 换成mg.