凝血酶
-
凝血酶
货号:hyybb125-1000U 350元
别名 凝血酵素;Factor IIa
英文名称 Thrombin from bovine plasma
CAS 9002-04-4
储存条件 −20℃
规格 1000u
理化性质:
外观(性状) 白色、浅黄色或浅灰色冻干粉
酶活/效价 1000 units/0.85mg solid
产品应用:
一、凝血实验
凝血酶(Thrombin)来源于牛血浆,分子量 37KD ,是由两条肽链(31KD 和 6KD)通过二硫键 组成的 。凝血酶是凝血酶原(凝血因子 Ⅱ) 激活后形成的蛋白质水解酶,其催化纤维蛋白原 (fibrinogen)水解掉 A 肽和B 肽,由此形成纤维蛋白单体,单体进一步聚合,在血小板、红细胞 和白细胞等参与下形成血凝块。
凝血酶酶活:固体活力:50-200 单位/mg solid;比活力:比活力大于 2000 单位/mg protein; 酶活检测方法:以纤维蛋白原为底物,按 2010 版药典凝血酶冻干粉检测。
产品稳定性好:冻干产品在室温条件下考察 12 个月,酶活力未见显著变化,冷藏条件下保存 36 个月,酶活力未见显著变化。
二、标签切割
由于凝血酶具有切割序列专一性强,水解效率高的特点,它也被广泛地应用于基因工程产品的 开发,其应用之一是作为工具蛋白酶用于重组融合蛋白质的特异性断裂,尤其适用于生物工程制药 业及基因工程、生物化学、分子生物学等研究。
凝血酶是一种广泛用于切割标签的蛋白酶,凝血酶最佳切割位点是 X4-X3-P-R[K]-X1'-X2',这里 X4 和 X3 是疏水氨基酸而 X1'和 X2'是非酸性氨基酸,一些经常使用的识别位点是
L-V-P-R-G-S,L-V-P-R-G-F,和 M-Y-P-R-G-N。在 X4-X3-P-R-G-X2'之间切割比在 X4-X3-P-K-L-X2'更 有效。其他识别位点是 X2-R[K]-X1', 这里 X2 或者 X1'是甘氨酸,例如 A-R-G 和 G-K-A ,这里切 割发生在第二个残基后。在凝血酶切割位点和 N 末端标签之间插入五个甘氨酸残基可改善切,通过 这一"甘氨酸连接肽"只需较少酶量就可达到完全切割,而且也可以避免可能发生的错误切割。
作为切割标签的蛋白酶具有以下特点:
1. 纯度高:SDS-PAGE 检测图谱无杂蛋白条带;
2. 不含有其他蛋白酶活性;
3. 酶切活性高,能够有效切质量比为 1:1000 的蛋白。切割可在 20℃到 37℃之间切割 0.3 到 16 小 时。
4. 有效的酶切缓冲液是 20mM Tris-HCl 缓冲液,含 150mM 氯化钠,pH8.0。
5. 凝血酶可从切割产物中用 p-氨基琼脂糖亲和纯化,或者苯甲脒琼脂糖移去。
注意事项:
1.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2.为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
3.实验结果可由多种因素影响,相关处理只限于产品本身,不涉及其他赔偿。