农杆菌侵染液（烟草专用）

农杆菌侵染液（烟草专用）

产品内容：

 产品组分 规格 储存温度

 5×农杆菌侵染液（烟草专用） 100 mL       2-8℃

 乙酰丁香酮溶液（100 mM）  50 μL×10    -20℃

运输及储存条件：蓝冰运输；-20℃储存，保质期 18 个月；其中侵染液（未加入 AS）可以 2-8℃或者常温储存。

产品介绍：

本产品为 5×母液，已过滤除菌。使用时只需加水稀释至 1×，加入乙酰丁香酮（AS）溶液（终浓度为100 μM）后，即可用于农杆菌介导的烟草瞬时转化。

农杆菌侵染液中添加了适宜浓度的 MgCl2 和 MES，可以为农杆菌侵染创造适宜的环境，通过减小表面张力增加农杆菌在受体细胞上的吸附，而且可以通过其对细胞膜通透性的影响提高 T-DNA 的转运效率。AS 可以诱导农杆菌 Vir 基因的活化与表达，促进 T-DNA 的加工与转移，从而促进外源 DNA 整合到植物基因组中。使用本产品的转化效果明显优于去离子水和 MS 培养基。

注意事项：

1. 使用本产品时请注意无菌操作，若开封后的产品染菌请勿使用。

2. AS 需要在临用时加入农杆菌侵染液中，加入 AS 的侵染液不可长时间储存。

3. AS 溶液（100 mM）可单独在本司购买。

4. 未开封产品保质期一年，开封后根据存放条件的不同保质时间存在一定的差异。

5. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

6. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明：（在开始操作前请先阅读注意事项）

1. 含有目的质粒的农杆菌摇菌至 OD600 为 0.6 左右，5000 rpm 离心 5 min，收集菌体；

2. 配制含 100 μM AS 的农杆菌侵染液（现用现配）：

在无菌环境下，使用无菌去离水将 5×农杆菌侵染液母液稀释为 1×工作液。每 100 mL 工作液中加入 100μL 乙酰丁香酮母液（100 mM）。混匀后即可使用。

3. 用等体积侵染液（含 100 μM AS）轻轻重悬菌体，菌液浓度调至 OD600 为 0.6 左右，完成侵染菌液的配置。

4. 根据后续实验需求可注射烟草叶片进行瞬时转化或进行外植体浸泡。相关操作方法可参考文献或其它方案描述。