DNS显色液(溶液),DNS试剂,DNS溶液
DNS显色液(溶液)
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DNS显色液(溶液)
hyykb79031-100ml
还原糖是指含有自由醛基或酮基的糖类。单糖都是还原糖,双糖和多糖不一定是还原糖,例如乳糖和麦芽糖是还原糖,蔗糖和淀粉是非还原糖。利用各种糖的溶解度不同,可将植物样品中的单糖、双糖和多糖分别提取出来。对非还原性的双糖和多糖,可用酸水解法使其降解成还原性单糖进行测定,再分别求出样品
中还原糖和总糖的含量(常以葡萄糖含量计)。
DNS 法(二硝基水杨酸法)是一种基于氧化还原反应检测还原糖的方法。其原理为,在碱性条件下,还原糖被加热氧化成糖酸及其它产物,而氧化剂 3,5-二硝基水杨酸被还原为棕红色的 3-氨基-5-硝基水杨酸。在一定范围内,还原糖的量与棕红色物质颜色的深浅成正比关系,利用分光光度计在 540 nm 波长下测定光
密度值,查对标准曲线并计算,便可求出样品中还原糖和总糖的含量。由于多糖水解为单糖时,每断裂一个糖苷键需加入一分子水,所以在计算多糖含量时应乘以系数 0.9。
使用方法(仅作参考):
1. 葡萄糖标准曲线的绘制
分别取葡萄糖标准液(1mg/ml)0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL 于 25 mL 试管中,分别准确加入 DNS 试剂2 mL,沸水浴加热 2 min,流水冷却,用水补足到 15 mL 刻度。在 540 nm 波长下测定吸光度。
2. 样品的测定
样品液适当稀释,使糖浓度为 0.1-1.0 mg/mL,取稀释后的糖液 1.0 mL 于 15 mL 刻度试管中,加 DNS 试剂2.0 mL,沸水煮沸 2 min,冷却后用水补足到 15 mL 刻度,在 540 nm 波长下测定吸光度。从标准曲线查出葡萄糖 mg/mL 数。求出样品中糖含量。
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